pda培养基
pda培养基制作步骤？
pda培养基制作步骤？
准备工作：首先是准备好试管、棉塞等基本物品，在根据实际情况准备配方材料，本文用于举例的使用量为土豆200g，葡萄糖20g，琼脂10g，磷酸二氢钾3.0g，七水硫酸镁1.50g，自来水适量，自然PH。
称取药品与提取土豆：计算好实际药品的用量后，用电子天平称取土豆、葡萄糖、琼脂，用分析天平称取磷酸二氢钾和七水硫酸镁。按配方放入烧杯中。将土豆洗净并去皮，称量其质量。再将其切成小块放入锅中，加水1200ml，在电磁炉上按烧水键加热至沸腾，然后调100℃保持１５分钟，趁热用４层纱布过滤，把滤液加入上面的烧杯中。
加热溶解：上述的滤液会溶解部分药品，但是还有大部分药品没有溶解，所以我们需要把烧杯放入水浴锅中（９５℃以上加热，并用玻璃棒不断搅拌，待琼脂完全溶解后，在补充水至１０００ｍｌ）。
装试管：可用带胶帽的移液管移取，同时应尽量避免培养液沾在试管口，以免造成污染。我们可以把烧杯放在热水的锅中，这样可以避免我们在装样时培养液会凝固的问题。固体培养基分装的量一般为试管高度的１/５，这样可以使得灭菌后制成的斜面比较满足条件——斜面占试管的一半。
加棉塞：当第四步完成以后，接下来需要在试管口塞上棉塞，以防止外界微生物进入培养基内造成污染，同时能够保证其中有良好的通气能力。
集中：将全部试管用棉绳捆好放入烧杯中，再在整个棉塞外包扎一层纸，用棉绳扎紧，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞和棉塞冲出。
灭菌处理：使用高压蒸汽灭菌锅灭菌，在１２１℃，１０５ｋｐａ压力下灭菌１５分钟。在使用前注意向高压蒸汽灭菌锅中加入适量的水，同时要使测温棒浸没。
倒斜面：将灭菌后的试管趁热斜置于棍条上，倾斜度以试管中的培养液占试管长度的１/２为宜，凝固２个小时后即成斜面培养基（琼脂９５℃溶解、４０℃凝固）。
无菌检查：将灭菌冷却后的培养基放入２５℃恒温培养箱内培养４８小时，若培养基上无杂菌生长，则可以低温保存备用。