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做箱培菌有什么要求?

做箱培菌有什么要求?

培养细菌要在洁净的环境中接种,需要超净工作台、酒精灯;配制培养基的试剂如:酵母膏、蛋白胨、各种无机盐、琼脂等,或买现成的培养基;培养基灭菌需要高压灭菌锅;接种需要接种环或接种针,液体接种需要移液管或移液器和灭菌的吸头;固体培养需要培养皿,在恒温培养箱中静态培养;液体培养需要三角瓶在摇床(恒温振荡器)中培养;培养好后检验还需要光学显微镜、染色还需要染色剂;菌种保藏需要试管(带透气的塞子)制作斜面,并保藏在冰箱中;如果大规模培养还需要发酵罐及其附属设备;厌氧菌培养还需要厌氧培养箱和操作台。

厌氧细菌需要振荡培养吗?

液体培养最好还是振荡吧,不然菌体在培养过程中会沉降,造成局部营养供应不足、不利于菌体生长,造成处理效果差。
至于在厌氧条件下如何振荡培养,两种解决方案:
(一)不在厌氧箱中操作,液体培养容器(如血清瓶)充入惰性气体排除残存空气,严格密封,震荡培养箱中培养;或将震荡箱放在厌氧袋中(持续充氮气一段时间)。
(二)在厌氧培养箱内,将震荡培养箱放入厌氧箱(同震荡箱放在厌氧袋中),前提是能够放入;或向培养容器中加入磁转子(最好不与培养基中物质反应),将容器放在磁力搅拌器(一般比较小)上,调节转速,也能起到使培养基混合、菌体混匀生长的目的。

求助:厌氧菌的培养方法及常用培养基配方?

厌氧菌的培养方法
厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌,必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂,或用物理、化学方法去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基,牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多,可根据实际情况选用。
  1.厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养出来。
  2.厌氧袋(Bio-bag)即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生管,后折断美兰指示剂管,命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态,可以孵育。
  3.厌氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱,箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板,板上装有两个手套,可通过手套在箱内进行操作,故名。箱侧有一交换室,具有内外二门,内门通箱内先关着。欲放物入箱,先打开外门,放入交换室,关上外门进行抽气和换气(H2,CO2,N2)达到厌氧状态,然后手伸入手套把交换室内门打开,将物品移入箱内,关上内门。箱内保持厌氧状态,也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度,本身是孵箱或孵箱即附在其内,还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落,这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究,大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
4.厌氧盒:原理同厌氧袋,有成品销售。
5.生物耗氧法:在一密闭的容器内放以生物(多是植物),消耗氧气,同时产生二氧化碳,供细菌生长用。我没见过。
6.焦性末食子酸法:在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸,均匀撒上焦性末食子酸,然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面,用融化的白蜡封边,造成一个封闭空间。焦性末食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养,简单。如有梭状芽孢杆菌。
7.疱肉培养基:本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法。疱肉和肉汤装入大试管,液面封凡士林,造成无氧环境。