流式细胞术原理及步骤

流式细胞术的基本原理?

流式细胞术的基本原理?

原理:根据激发光的强弱,来判断细胞和染色物质的结合情况,从而得到要检测的结果。
1.
将待测细胞染色后,制成单细胞悬液。
2.
用一定压力将待测样品压人流动室,同时不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出,鞘液管人口方向与待测样品流成一定角度,鞘液就能够包绕着样品高速流动,组成一个圆形的流束,待测细胞在鞘液的包被下单行排列,依次通过检测区域。
3.
流式细胞仪通常以激光作为发光源,经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染色的细胞在激光束的照射下,产生散射光信号和荧光信号。

什么是流式荧光技术?

FISH,荧光原味杂交,应用荧光标记的DNA探针检测细胞中的特定基因是否表达、表达的量、是否异常、表达位置等信息,使用仪器是荧光显微镜;
融合基因,会提取检测细胞cDNA,应用已知融合基因引物kit,在RT-PCR仪检测进行扩增,如果存在融合基因,则可扩增出相应的产物,根据产物的荧光强度,还能检测出融合基因含量;
流式细胞术,使细胞形成单细胞悬液,应用荧光标记的抗体分子标记细胞,根据荧光分子表达情况检测细胞表面目的抗原。
关系:都应用荧光技术进行检测,
区别:检测的目的、方法、仪器均不同(顺带说一句,FISH和流式可以合作检测端粒酶,这种技术叫“FISH-Flow”因为是用流式仪检测的)

流式报告是什么意思?

临床常说的“流式”是流式细胞术(flow cytometry)的简称,因其检测在液体中移动的细胞或粒子而得名。
具体来说,单个细胞悬液中加入一个或多个荧光标记的抗体,抗体通过抗原抗体反应与细胞上的抗原结合。在流式细胞仪中,细胞在鞘液中单个流动,就像红细胞单个通过毛细血管一样通过检测口,仪器发出一个或多个激光束激发标记在细胞上的荧光物质。从荧光物质发出的光被收集、分离、检测,其数据被传输到控制流式细胞仪的计算机供分析。

流式细胞图四个象限分别代表什么?

左上象限为坏死细胞,左下象限为正常细胞,右上象限为早期凋亡细胞,右下象限为晚期凋亡细胞。

流式细胞仪实验目的?

流式细胞仪主要用于检测细胞膜渗透性丶细胞核中DNA和RNA基因状况,以及做基因亲子鉴定等。